(फ्लो सायटोमेट्री , FCM ) हे सेल विश्लेषक आहे जे स्टेन्ड सेल मार्करच्या फ्लोरोसेन्स तीव्रतेचे मोजमाप करते. हे एक उच्च-तंत्रज्ञान तंत्रज्ञान आहे जे विश्लेषण आणि एकल पेशींचे वर्गीकरण यावर आधारित आहे. हे पेशींचे आकार, अंतर्गत रचना, डीएनए, आरएनए, प्रथिने, प्रतिजन आणि इतर भौतिक किंवा रासायनिक गुणधर्म त्वरीत मोजू शकते आणि वर्गीकृत करू शकते आणि या वर्गीकरणांच्या संग्रहावर आधारित असू शकते.
फ्लो सायटोमीटरमध्ये प्रामुख्याने खालील पाच भाग असतात:
1 फ्लो चेंबर आणि फ्ल्युडिक्स सिस्टम
2 लेसर प्रकाश स्रोत आणि तुळई आकार प्रणाली
3 ऑप्टिकल प्रणाली
4 इलेक्ट्रॉनिक्स, स्टोरेज, डिस्प्ले आणि विश्लेषण प्रणाली
5 सेल वर्गीकरण प्रणाली
त्यापैकी, लेसर प्रकाश स्रोत आणि बीम फॉर्मिंग सिस्टममधील लेसर उत्तेजना हे फ्लो सायटोमेट्रीमध्ये फ्लूरोसेन्स सिग्नलचे मुख्य मापन आहे. उत्तेजित प्रकाशाची तीव्रता आणि एक्सपोजर वेळ फ्लोरोसेन्स सिग्नलच्या तीव्रतेशी संबंधित आहेत. लेसर हा एक सुसंगत प्रकाश स्रोत आहे जो एकल-तरंगलांबी, उच्च-तीव्रता आणि उच्च-स्थिरता प्रदीपन प्रदान करू शकतो. या गरजा पूर्ण करण्यासाठी हा आदर्श उत्तेजित प्रकाश स्रोत आहे.
लेसर स्त्रोत आणि फ्लो चेंबर दरम्यान दोन दंडगोलाकार लेन्स आहेत. हे लेन्स लेसर स्रोतातून उत्सर्जित केलेल्या वर्तुळाकार क्रॉस-सेक्शनसह लेसर बीमवर एका लहान क्रॉस-सेक्शनसह (22 μm × 66 μm) लंबवर्तुळाकार बीममध्ये केंद्रित करतात. या लंबवर्तुळाकार बीममधील लेसर ऊर्जा सामान्य वितरणानुसार वितरीत केली जाते, लेसर शोध क्षेत्रातून जाणाऱ्या पेशींसाठी सातत्यपूर्ण प्रदीपन तीव्रता सुनिश्चित करते. दुसरीकडे, ऑप्टिकल सिस्टीममध्ये लेन्स, पिनहोल आणि फिल्टरचे अनेक संच असतात, जे साधारणपणे दोन गटांमध्ये विभागले जाऊ शकतात: फ्लो चेंबरच्या अपस्ट्रीम आणि डाउनस्ट्रीम.
फ्लो चेंबरच्या समोरील ऑप्टिकल सिस्टममध्ये लेन्स आणि पिनहोल असतात. लेन्स आणि पिनहोल (सामान्यत: दोन लेन्स आणि एक पिनहोल) चे मुख्य कार्य म्हणजे लेसर स्त्रोताद्वारे उत्सर्जित केलेल्या गोलाकार क्रॉस-सेक्शनसह लेसर बीमला एका लहान क्रॉस-सेक्शनसह लंबवर्तुळाकार बीममध्ये केंद्रित करणे. हे सामान्य वितरणानुसार लेसर उर्जेचे वितरण करते, लेसर शोध क्षेत्रावरील पेशींसाठी सातत्यपूर्ण प्रदीपन तीव्रता सुनिश्चित करते आणि भटक्या प्रकाशाचा हस्तक्षेप कमी करते.
फिल्टरचे तीन मुख्य प्रकार आहेत:
1: लाँग पास फिल्टर (LPF) - विशिष्ट मूल्यापेक्षा जास्त तरंगलांबी असलेल्या प्रकाशालाच त्यातून जाण्याची परवानगी मिळते.
2: शॉर्ट-पास फिल्टर (SPF) - केवळ विशिष्ट मूल्यापेक्षा कमी तरंगलांबी असलेल्या प्रकाशाला जाण्याची परवानगी देते.
3: बँडपास फिल्टर (BPF) - केवळ एका विशिष्ट तरंगलांबीच्या श्रेणीतील प्रकाशाला जाऊ देतो.
फिल्टरचे वेगवेगळे संयोजन वेगवेगळ्या तरंगलांबीवरील फ्लूरोसेन्स सिग्नलला वैयक्तिक फोटोमल्टीप्लायर ट्यूब (PMTs) वर निर्देशित करू शकतात. उदाहरणार्थ, पीएमटीच्या समोरील ग्रीन फ्लोरोसेन्स (FITC) शोधण्यासाठी फिल्टर्स LPF550 आणि BPF525 आहेत. PMT समोर नारंगी-लाल फ्लोरोसेन्स (PE) शोधण्यासाठी वापरलेले फिल्टर LPF600 आणि BPF575 आहेत. PMT समोरील लाल प्रतिदीप्ति (CY5) शोधण्यासाठी फिल्टर LPF650 आणि BPF675 आहेत.
फ्लो सायटोमेट्री प्रामुख्याने सेल सॉर्टिंगसाठी वापरली जाते. संगणक तंत्रज्ञानाच्या प्रगतीमुळे, इम्युनोलॉजीचा विकास आणि मोनोक्लोनल अँटीबॉडी तंत्रज्ञानाचा शोध, जीवशास्त्र, वैद्यक, फार्मसी आणि इतर क्षेत्रांमध्ये त्याचे उपयोग अधिकाधिक व्यापक होत आहेत. या ऍप्लिकेशन्समध्ये सेल डायनॅमिक्स विश्लेषण, सेल ऍपोप्टोसिस, सेल टायपिंग, ट्यूमर निदान, औषध परिणामकारकता विश्लेषण इ.
पोस्ट वेळ: सप्टेंबर-21-2023
