(फ्लो सायटोमेट्री, एफसीएम) हे एक पेशी विश्लेषक आहे जे स्टेन्ड सेल मार्करच्या फ्लोरोसेन्स तीव्रतेचे मोजमाप करते. हे एकल पेशींचे विश्लेषण आणि वर्गीकरण यावर आधारित विकसित केलेले एक उच्च-तंत्रज्ञान तंत्रज्ञान आहे. ते पेशींचे आकार, अंतर्गत रचना, डीएनए, आरएनए, प्रथिने, प्रतिजन आणि इतर भौतिक किंवा रासायनिक गुणधर्मांचे द्रुतपणे मोजमाप आणि वर्गीकरण करू शकते आणि या वर्गीकरणांच्या संग्रहावर आधारित असू शकते.
फ्लो सायटोमीटरमध्ये प्रामुख्याने खालील पाच भाग असतात:
१ फ्लो चेंबर आणि फ्लुइडिक्स सिस्टम
२ लेसर प्रकाश स्रोत आणि बीम आकार देणारी प्रणाली
३ ऑप्टिकल सिस्टम
४ इलेक्ट्रॉनिक्स, स्टोरेज, डिस्प्ले आणि विश्लेषण प्रणाली
५ पेशी वर्गीकरण प्रणाली
त्यापैकी, लेसर प्रकाश स्रोत आणि बीम फॉर्मिंग सिस्टममधील लेसर उत्तेजना हे फ्लो सायटोमेट्रीमध्ये फ्लोरोसेन्स सिग्नलचे मुख्य मापन आहे. उत्तेजित प्रकाशाची तीव्रता आणि एक्सपोजर वेळ फ्लोरोसेन्स सिग्नलच्या तीव्रतेशी संबंधित आहेत. लेसर हा एक सुसंगत प्रकाश स्रोत आहे जो एकल-तरंगलांबी, उच्च-तीव्रता आणि उच्च-स्थिरता प्रकाश प्रदान करू शकतो. या आवश्यकता पूर्ण करण्यासाठी हा आदर्श उत्तेजित प्रकाश स्रोत आहे.
लेसर स्रोत आणि फ्लो चेंबरमध्ये दोन दंडगोलाकार लेन्स आहेत. हे लेन्स लेसर स्रोतातून उत्सर्जित होणाऱ्या वर्तुळाकार क्रॉस-सेक्शन असलेल्या लेसर बीमला एका लहान क्रॉस-सेक्शन (२२ μm × ६६ μm) असलेल्या लंबवर्तुळाकार बीममध्ये केंद्रित करतात. या लंबवर्तुळाकार बीममधील लेसर ऊर्जा सामान्य वितरणानुसार वितरीत केली जाते, ज्यामुळे लेसर शोध क्षेत्रातून जाणाऱ्या पेशींसाठी सातत्यपूर्ण प्रकाश तीव्रता सुनिश्चित होते. दुसरीकडे, ऑप्टिकल सिस्टममध्ये लेन्स, पिनहोल आणि फिल्टरचे अनेक संच असतात, जे अंदाजे दोन गटांमध्ये विभागले जाऊ शकतात: फ्लो चेंबरच्या अपस्ट्रीम आणि डाउनस्ट्रीम.
फ्लो चेंबरच्या समोरील ऑप्टिकल सिस्टममध्ये एक लेन्स आणि पिनहोल असते. लेन्स आणि पिनहोलचे (सामान्यतः दोन लेन्स आणि एक पिनहोल) मुख्य कार्य म्हणजे लेसर स्रोताद्वारे उत्सर्जित होणाऱ्या वर्तुळाकार क्रॉस-सेक्शनसह लेसर बीमला लहान क्रॉस-सेक्शन असलेल्या लंबवर्तुळाकार बीममध्ये केंद्रित करणे. हे सामान्य वितरणानुसार लेसर ऊर्जा वितरीत करते, लेसर शोध क्षेत्रामध्ये पेशींसाठी सातत्यपूर्ण प्रकाश तीव्रता सुनिश्चित करते आणि भटक्या प्रकाशापासून होणारा हस्तक्षेप कमी करते.
फिल्टरचे तीन मुख्य प्रकार आहेत:
१: लाँग पास फिल्टर (LPF) - केवळ विशिष्ट मूल्यापेक्षा जास्त तरंगलांबी असलेल्या प्रकाशालाच जाण्याची परवानगी देतो.
२: शॉर्ट-पास फिल्टर (SPF) - केवळ विशिष्ट मूल्यापेक्षा कमी तरंगलांबी असलेल्या प्रकाशालाच त्यातून जाण्याची परवानगी देतो.
३: बँडपास फिल्टर (BPF) - केवळ विशिष्ट तरंगलांबी श्रेणीतील प्रकाशच त्यातून जाऊ देतो.
फिल्टर्सचे वेगवेगळे संयोजन वेगवेगळ्या तरंगलांबींवर फ्लोरोसेन्स सिग्नल वैयक्तिक फोटोमल्टीप्लायर ट्यूब्स (PMTs) कडे निर्देशित करू शकतात. उदाहरणार्थ, PMT च्या समोर हिरवा फ्लोरोसेन्स (FITC) शोधण्यासाठी फिल्टर LPF550 आणि BPF525 आहेत. PMT च्या समोर नारंगी-लाल फ्लोरोसेन्स (PE) शोधण्यासाठी वापरले जाणारे फिल्टर LPF600 आणि BPF575 आहेत. PMT च्या समोर लाल फ्लोरोसेन्स (CY5) शोधण्यासाठी फिल्टर LPF650 आणि BPF675 आहेत.
फ्लो सायटोमेट्रीचा वापर प्रामुख्याने पेशी वर्गीकरणासाठी केला जातो. संगणक तंत्रज्ञानाच्या प्रगतीसह, रोगप्रतिकारक शक्तीचा विकास आणि मोनोक्लोनल अँटीबॉडी तंत्रज्ञानाचा शोध लागल्याने, जीवशास्त्र, औषध, फार्मसी आणि इतर क्षेत्रात त्याचे अनुप्रयोग अधिकाधिक व्यापक होत आहेत. या अनुप्रयोगांमध्ये पेशी गतिशीलता विश्लेषण, पेशी अपोप्टोसिस, पेशी टायपिंग, ट्यूमर निदान, औषध प्रभावीपणा विश्लेषण इत्यादींचा समावेश आहे.
पोस्ट वेळ: सप्टेंबर-२१-२०२३
